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                  新芝生物組織研磨儀助力“非洲豬瘟”樣品處理

                  來源:www.dyog.tw 作者:新芝生物 時間:2018-12-29

                  八戒:猴哥救我!
                  悟空:呆子,何事慌張!
                  八戒:猴哥你沒聽說嗎!非洲豬瘟來了,一個被傳染,一窩都遭殃啊!我聽說遼寧、黑龍江、吉林、江西、福建、四川好多兄弟都已經被撲殺了。
                  悟空:呆子!那還不離我遠點! 


                   



                  問題一、什么是非洲豬瘟?


                  非洲豬瘟(African Swine fever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(African Swine fever virus,ASFV)感染家豬和各種野豬(不傳染人)引起一種急性、出血性、烈性傳染病。其特征是發病過程短,最急性和急性感染死亡率高達100%,且只能依靠實驗室監測確診。   
                  2018年8月3日我國確診首例非洲豬瘟疫情。

                   

                  問題二、目前在中國的傳染范圍?

                  自8月初我國首次發現非洲豬瘟以來,截至11月22日,全國有20個省份47個市(區、盟)發生73起家豬疫情、1起野豬疫情,累計撲殺生豬60萬頭。全國非洲豬瘟疫情呈現多點散發狀態,但在各地動物疾控部門的積極行動下,疫情開始趨于平穩,總體防控有效。


                    



                   問題三、非洲豬瘟檢測的樣品處理方法介紹
                   一、非洲豬瘟樣品處理
                   1. 目的

                  規范ASFV樣品和實驗材料的處理程序,保證ASFV相關實驗的順序開展和實驗室的生物安全。


                   2. 適用范圍

                  適用于疑似ASFV臨床樣品的實驗前的處理


                   3. 程序
                   3.1實驗材料

                  ASF的易感動物,主要為家豬、野豬和蜱,通常采集的樣品為家豬、野豬的血液樣品、組織樣品以及蜱三類。田間采集的樣品通常需要經過簡單的預處理,才能進行后續的檢測、診斷工作。


                   血清:用于病毒核酸檢測、病毒抗原和抗體檢測。將采好的豬血的注射器或采血管在室溫下傾斜靜止2~4h(防止暴曬),或置于37溫箱內1h,待大部分血清析出后,取出血清,必要時經離心分離血清。(最低建議量5ml)。


                   抗凝全血:用于病毒核酸檢測和病毒抗原檢測。
                   采血前,在真空采血管或注射器內按比例加入抗凝劑。采集血液,輕輕上下顛倒,使血液與抗凝劑充分混勻,防止血液凝固的同時避免溶血。也可以將血液放入裝有玻璃珠的滅菌瓶內,震蕩脫落纖維蛋白。必要時,可加入雙抗以抑制血源性或采血過程中可能出現的細菌污染。
                   當血樣用于病毒核酸檢測時,一般不用肝素而選用EDTA作為抗凝劑。(最低建議量1mL)。


                   組織樣本:活體采集,采用扁桃體,用于臨床健康動物ASF監測。
                   尸體剖檢ASF發病動物或死亡動物經解剖取材,包括:ASFV靶器官的采集:脾臟、淋巴結、腎臟、扁桃體。


                   其他病變組織臟器的采集:采集具有明顯病變的肝臟、肺臟、心臟等組織器官,選取部位在病變和健康組織交界處。


                   腐敗動物尸體的樣品采集:剖檢取股骨,將附著的肌肉和韌帶等全部剔除,采集骨髓。最低建議量5克。


                   蜱的采集:蜱可進行核酸檢測、抗原檢測和蜱的形態學鑒定,查找豬圈的墻邊、墻縫、木質或瓦質的屋頂,或挖掘豬圈地面均可能找到蜱,也可查看豬表皮,采集蜱。


                   1-1樣品保存條件

                  樣品名稱 \ 溫度要求或條件

                  采集過程

                  運輸及檢測過程
                       (短時間保存)

                  長期保存

                   

                  抗凝血

                  冷藏

                  冷藏

                  -70或者-196

                  血清

                  冷藏

                  冷藏

                  -70或者-196

                  肝血濾紙片

                  常溫

                  常溫

                  -

                  濾紙

                  冷藏或常溫

                  冷藏或常溫

                  冷藏或常溫

                   

                  固定組織

                  常溫

                  常溫

                  常溫

                  組織觸片

                  常溫

                  常溫

                  -

                  新鮮組織

                  冷藏

                  冷藏或常溫
                       (滅菌的組織保存液中保存)

                  -70或者-196

                  活體

                  15~22

                  15~22

                  15~22(血飼)[9.19]

                  固定

                  常溫

                  常溫

                  常溫

                  速凍

                  -70或者-196

                  -70或者-196

                  -70或者-196

                  注:用于病毒分離和病理學檢測的樣品禁止-20保存。


                  3.2實驗器材和試劑

                  1. 臺式高速冷凍離心機、組織研磨儀、水浴鍋、計時器、冰箱和移液器等。

                  2. 無菌的剪子、鑷子、鋼珠、2mLEP管、移液器吸頭(10μL,200μL、1000μL)等。

                  3. 其他試劑和耗材主要包括:0.01mol/L PBS(PH7.2)、0.8%NaOH、75%酒精棉球等。


                  3.3樣品處理程序
                  3.3.1血清及全血樣品處理
                  取血清或全血樣品1mL于滅菌EP管里,保存備用
                  3.3.2組織樣品處理
                  適用于脾臟等組織樣品和蜱的處理。盡可能減少污染,每取一個組織塊或蜱,用火焰消毒剪鑷等取樣器械,組織塊應分別放入滅菌容器內并立即密封,做好標記,注意防止組織間相互污染。
                  3.3.2.1組織樣品的處理應在二級生物安全柜中進行,勿使液體濺到生物安全柜中。
                  3.3.2.2將0.1-0.2g組織塊放入2mLEP管中,用剪刀剪成碎塊,加1-2mL0.01mol/L PBS(PH7.2),再加入1-2粒滅菌鋼珠,密封后,表面消毒備用。剩余樣品放回容器內,重新密封,表面消毒后保存-70冰箱。
                  3.3.2.3組織樣品的破碎可以利用組織研磨儀在生物安全柜外操作,將樣品制成組織懸液。
                  重磅推薦使用Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器!!!!

                   

                  3.4病毒滅活

                  病毒的滅活處理應在二級生物安全柜中進行,將處理好的血清、全血或者研磨破碎后的組織樣品連同EP管放入60水浴中,放置30min滅活。


                  3.5使用后儀器處理

                  剪刀、鑷子等均應放入消毒缸進行消毒,放入鐵飯盒內,并裝入密封袋內進行高壓滅菌處理。裝有組織樣品保存液的容器和盛有組織塊的離心管應密封管口,表面消毒后放入密封袋中高壓滅菌。鋼珠、吸頭等廢棄物應用0.8%NaOH浸泡30分鐘消毒后,置密封袋內高壓滅菌。消毒殘液應裝入密封容器內高壓滅菌處理。

                  3.6注意事項

                  操作之前要確認生物安全柜和實驗室已進行了徹底的衛生消毒處理,防止樣品間交叉感染。

                   

                  二、非洲豬瘟病毒的核酸檢測可用實時熒光PCR配套相應實際進行,具體操作步驟以儀器生產公司指南為準。

                  問題四、病毒殺滅和防控方式

                  非洲豬瘟病毒雖然在環境中比較穩定,但在豬肉烹煮處理過程中較易失活,70-75加熱30分鐘以上,病毒就會被殺滅,也就是說我們日常烹飪過程中只要把豬肉熟透(包括最中間部位溫度至少達到70以上),即使有病毒也會很快失去感染力并喪失活性。

                    

                  新芝生物Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器介紹


                  新芝生物推出的Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器具備以下特征:
                  1.應用場景多樣。可以對不同組織進行干磨、濕磨、混合以及均質化處理。
                  2.實驗效率高。能提高提取大通量樣品中核酸的效率和質量。
                  3.實驗過程安全。研磨過程采用封閉式一次性離心管,有效地避免了樣品交叉污染。
                  4.儀器穩定性好。對同一組織樣品可設定相同的研磨程序,從而獲得相同的研磨效率,提高了實驗的可重復性。
                  5.研磨效果好。產品采用高效研磨球進行研磨,相較于傳統研磨方式對樣品的研磨更為均勻、充分。

                   

                  目前,新芝生物Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器已助力沈陽、大連、朝陽、本溪、鞍山、錦州、葫蘆島等多地動物疾控中心用于非洲豬瘟檢測實驗的樣品前處理。
                  Scientz-48L冷凍型高通量組織研磨器高效、穩定、安全的儀器特性很好地解決了檢測過程中檢測樣品數量多、實驗一致性難以控制等問題,得到了廣大用戶的一致好評。


                  產品用途
                  1.適用于各種植物組織包括根、莖、葉、花、果、種子等樣品的研磨破碎;
                  2.適用于各種動物組織包括大腦、心臟、肺、胃、肝臟、胸腺、腎臟、腸、淋巴結、肌肉、骨骼等樣品的研磨破碎;
                  3.適用于真菌、細菌等樣品的研磨破碎;
                  4.適用于食品、藥品成分分析檢測的研磨破碎;
                  5.適用于易揮發樣品包括煤炭、油頁巖、蠟制品等樣品的研磨破碎;
                  6.適用于塑料、聚合物包括PE、PS、紡織品、樹脂等樣品的研磨破碎。


                  主要技術參數
                  1.時間設定:1(秒)-9999(秒)
                  2.頻率設定:10-70Hz,即振蕩300-2100次/min
                  3.額定功率:180W
                  4.夾具行程:34mm(垂直)
                  5.溫度設置 : -20或者-30
                  6.電磁鎖控制開門
                  7.樣品容量:隨機標配:鋁合金適配器5ml 12孔,2ml 48孔 

                  可選配:鋁合金適配器2ml24孔 

                  8.電源需求:220V單相交流,<2.5A


                  新芝生物公司簡介

                  寧波新芝生物科技股份有限公司(股票代碼:430685)始創于1989年,公司總部位于寧波市國家高新區,注冊資金6102萬元,是全球知名的生物樣品處理設備提供商,也是國內超聲波技術應用探索的先行者。

                  依托強大的科研技術實力,公司在超聲波、溫濕度、高低壓、超低溫等技術層面積累了豐厚的經驗,并先后研究開發包括生物樣品前處理儀器、分子生物學儀器、實驗室潔凈設備、冷凍干燥設備、工業防垢除垢設備、環保除藻防控設備在內的多款產品。公司始終堅持業界前沿的技術研究和應用開發,致力于為科研、教育、環保、醫療、制藥、石化、農林、材料等領域客戶提供先進的產品設備和行業解決方案。

                  公司目前擁有寧波、杭州兩地四大研發中心,擁有高水平研發人員數十人,專利60余項。公司曾多次承擔國家科技部、發改委、衛生部重大科研項目,是國家發改委高技術產業化示范工程中心、科學儀器產業化基地、寧波企業工程(技術)中心。公司研制的高壓氣體基因槍一舉打破國外技術壟斷,填補國內相關領域空白,榮獲浙江省科技進步二等獎。

                  公司高度重視品牌培育和市場開拓,為更好地服務客戶,公司在全國各地建有30余個辦事處,辦事處均配備銷售工程師和售后工程師,可隨時滿足客戶需求。全球超過15,000家實驗室在使用新芝生物的產品,各類儀器設備市場保有量超過100,000臺套,產品遠銷美、英、法、俄、日、韓等36個國家,公司年度銷售收入突破1億元人民幣,已經成為國內乃至全球知名的生物樣品制處理設備研制專家。

                  新芝生物30年風雨兼程,以新致心,將繼續致力于為各行業客戶提供優質的產品和貼心的服務!










                  寧波新芝生物科技股份有限公司 專業研發生產超聲波細胞粉碎機、低溫恒溫槽、超聲波細胞破碎儀和超聲波清洗機等科研實驗儀器與工業化生產設備

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